【摘 要】
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目的探讨丝裂素激活蛋白激酶(MAPK)信号通路在造影剂诱导的肾小管细胞凋亡中的作用。方法培养大鼠肾小管细胞(NRK-52E),分别加入不同种类和浓度的造影剂刺激,部分实验同时加
【机 构】
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深圳市人民医院肾内科,430060
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目的探讨丝裂素激活蛋白激酶(MAPK)信号通路在造影剂诱导的肾小管细胞凋亡中的作用。方法培养大鼠肾小管细胞(NRK-52E),分别加入不同种类和浓度的造影剂刺激,部分实验同时加入SB203580(p38MAPK抑制剂)。台盼蓝排除试验检测细胞膜完整性。流式细胞仪DNA分析、FITC-AnnexinⅤbinding/PI染色以及电镜扫描检测细胞凋亡。Western印迹分析和免疫沉淀法检测MAPK的磷酸化水平和活性。结果高渗性造影剂泛影葡胺可诱导NRK-52E细胞凋亡,并且,在一定的渗透浓度范围内,随着渗透浓度的升高,细胞凋亡率越高;在一定的时间范围内,随着时间的延长,细胞凋亡率也越高。低渗性造影剂欧乃派克在实验浓度范围内则不能诱导NRK-52E细胞凋亡。泛影葡胺刺激NRK-52E细胞15min后,p38MAPK磷酸化水平及活性便明显增加,并持续至60min,120min时磷酸化水平及活性明显降低,几乎回到零水平。总的p38MAPK水平在整个实验期间内几乎无变化。SB203580可明显抑制泛影葡胺诱导的NRK-52E细胞凋亡。p44/p42MAPK的磷酸化水平在整个实验阶段则无明显变化。结论造影剂呈渗透浓度和时间依赖性诱导NRK-52E细胞凋亡,造影剂诱导细胞凋亡与其高渗有关。p38MAPK信号通路的激活介导了造影剂诱导的NRK-52E细胞凋亡。
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