基于MS2衣壳蛋白系统的活细胞内Jun mRNA定位初探

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目的 检测细胞中Jun mRNA在活细胞内的定位.方法 设计引物,构建融合MS2茎环结构串联重复的Jun表达载体(pcDNA3.1-Jun-MS2-48X).转染细胞后,绿色荧光蛋白(GFP)-MS2融合蛋白可与MS2茎环串联重复结构结合,通过荧光显微镜观察GFP的细胞定位,能够间接确定Jun mRNA在细胞内的定位.结果 成功构建了pcDNA3.1-Jun-MS2-48X表达载体,经荧光显微镜观察,能够看到明显的绿色荧光,并且在细胞内聚集.结论 实现了在细胞内实时观察Jun mRNA,为在单细胞水平上Jun mRNA的定位提供了新的技术方法.
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