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目的 构建pcDNA3.1-RASSF1真核表达载体,并检测其对肝癌细胞系HepG2凋亡的影响.方法 应用聚合酶链反应技术从人RASSF1cDNA中扩增出RASSF1基因后,以内切酶Xho Ⅰ和EcoR Ⅰ进行双酶切,将其克隆入用相同酶处理的载体pcDNA3.1;将重组质粒pcDNA3.1-RASSF1转染肝癌HepG2细胞,应用Western blot法检测RASSF1的表达水平;用Annexin V/PI法检测细胞的凋亡情况.结果 酶切和测序结果表明,重组质粒pcDNA3.1-RASSF1构建成功;Western blot法结果表明转染pcDNA3.1-RASSF1后HepG2细胞中RASSF1表达升高;Annexin V/PI法用流式细胞术检测凋亡,空白组、pcDNA3.1组和pcDNA3.1-RASSF1组HepG2细胞的凋亡率分别为(5.8±0.42)%、(7.48±0.68)%和(35.1±3.15)%.结论 真核表达载体pcDNA3.1-RASSF1构建成功;RASSF1蛋白在HepG2细胞中高表达,并促进细胞凋亡。