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目的 建立稳定表达脑源性神经营养因子(BDNF)基因的神经干细胞并观察其对于体外培养的脊髓背根神经节(DRG)细胞存活及突起生长的影响.方法以PCR技术从人脑cDNA文库中获取人BDNF基因片段. 采用分子克隆技术构建带有绿色荧光蛋白报告基因的多顺反子的MSCV-BDNF-IRES2-EGFP重组鼠干细胞病毒表达载体,病毒经PT67细胞包装后感染神经干细胞株C17.2.通过免疫组化,RT-PCR,ELISA检测BDNF的表达,在双室共培养系统中共培养3,10 d后观察经筛选的稳定表达株对原代培养DRG细胞的生物学作用.结果 RT-PCR证实BDNF基因在C17.2细胞中转录,ELISA分析显示转基因C17.2培养上清中在转染24 h后即可检测到BDNF表达,并在3个月后仍表达(14.6±0.8)ng·d-1·10-1细胞;免疫细胞化学显示,与对照组相比较,BDNF基因修饰的神经干细胞组,DRG细胞突起生长较长交织呈网状的,节细胞存活较多.结论干细胞病毒介导转染的BDNF基因能够在神经干细胞C17.2中稳定表达,并且BDNF基因修饰的神经干细胞对体外培养的DRG细胞的存活及突起、延伸具有显著促进作用。