【摘 要】
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目的：原核表达和纯化小鼠血管内皮生长因子受体2（VEGFR．2）胞外区功能片段并用于抗VEGFR。2抗体的检测。方法：用PCR技术扩增编码VEGFR-2胞外区的DNA片段，将其克隆到原核表达载体pET2
【机 构】
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三峡大学医学院,分子生物学研究所,化学与生命科学学院
【基金项目】
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湖北省高等学校优秀中青年创新团队计划项目（编号：T201203）,三峡大学“求索”大学生创新基金项目
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目的：原核表达和纯化小鼠血管内皮生长因子受体2（VEGFR．2）胞外区功能片段并用于抗VEGFR。2抗体的检测。方法：用PCR技术扩增编码VEGFR-2胞外区的DNA片段，将其克隆到原核表达载体pET28a（＋）并转化大肠杆菌Rossetta（DE3）。在尿素变性条件下用Ni．NTA树脂亲和层析纯化IPTG诱导表达的基因融合蛋白，并用抗His抗体和抗VEGFR．2抗体分别对融合蛋白进行Westernblotting鉴定。ELISA法用于分析VEGFR-2胞外区功能片段在检测抗VEGFR．2抗体中的应用价值
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