论文部分内容阅读
目的研究冷冻复苏对肝细胞代谢活性及细胞色素P450（CYP）mRNA表达调控的的影响,为冷冻复苏肝细胞用于实验研究提供依据。方法采用程序冷冻降温仪冷冻新鲜分离的大鼠肝细胞,1个月后复苏。实时荧光定量PCR法检测细胞CYP1A2,CYP2B1和CYP3A1 mRNA的表达;高压液相色谱-串联质谱法检测细胞内咪达唑仑α-羟基化、双氯芬酸4-羟基化和右美沙芬去甲基化的代谢产物生成量。结果肝细胞冷冻复苏后存活率与新鲜细胞无明显差异,显微镜下可见细胞贴壁并连成片状,细胞核圆而亮。冷冻复苏肝细胞中CYP1A2和CYP