目的　调查本地区青霉素不敏感肺炎链球菌（PNSP）的pbp2b基因和氨基酸序列的变异特点。方法　2006年1－12月收集肺炎链球菌临床分离株24株，检测其对青霉素的敏感性，对青霉素不敏感肺炎链球菌的青霉素结合蛋白pbp2b基因进行PCR扩增和测序以及序列比对与生物信息学分析。结果　在13株青霉素不敏感肺炎链球菌中，均发生紧邻SSN的Thr⁴⁴⁵→Ala替换以及Glu⁴⁷⁵→Gly、Thr⁴⁸⁸→Ala/Ser的替换；而Glu³³²→Gly的替换也较常见，存在于12株PNSP（MIC≥0.25mg/L）；另外，在7株青霉素耐药的肺炎链球菌（MIC≥3mg/L）中，均发生了紧邻KTG之后Ala⁶¹⁸→Gly的替换，且这7株菌属于Baek′sⅡ群，与韩国菌株J77的核苷酸及氨基酸序列一致，而菌株14,15，8，11及24的氨基酸序列出现了新的变异，已向GenBank提交序列，获得序列号：EU035970，EU056919，EU056920，EU056921,EU106886。结论　本地区大多数的青霉素耐药肺炎链球菌pbp2b基因的变异序列高度相似，而青霉素中度敏感肺炎链球菌的基因序列产生新的变异。