【摘 要】
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目的本研究通过优化牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿BP亚单位单克隆抗体的性能,制备胶体金标记检测牛乳腺炎无乳链球菌的试纸条。方法利用pET30a(+)-BP重组质粒表达蛋白纯化
【机 构】
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内蒙古自治区乳源性致病菌防控工程技术研究中心,内蒙古民族大学生命科学学院,内蒙古民族大学乳源性致病菌研究所,山东绿都生物科技有限公司
【基金项目】
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内蒙古自治区科技厅社会发展领域计划项目(No.kjJH1701),国家自然科学基金项目(No.31560689),内蒙古自治区乳源性致病菌防控工程技术研究中心开放课题(No.MDK2018005、MDK2018001),内蒙古自治区第七批“草原英才”人才工程产业创新团队建设项目
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目的本研究通过优化牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿BP亚单位单克隆抗体的性能,制备胶体金标记检测牛乳腺炎无乳链球菌的试纸条。方法利用pET30a(+)-BP重组质粒表达蛋白纯化物免疫小鼠,无菌取脾细胞与sp2/0骨髓瘤细胞融合,筛选杂交瘤细胞,制备单克隆抗体,对单克隆抗体进行胶体金标记后制备检测试剂盒,并确定其灵敏度、特异性等技术指标。结果经数轮筛选,获得1株阳性杂交瘤细胞株,抗体效价达到1∶25600。胶体金标记试纸条灵敏度量达到10~6 CFU/mL。特异性测试结果表明,胶体金标记试纸条与金黄色葡
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