葡萄球菌肠毒素B突变体的纯化及其活性

来源 :复旦学报(医学科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：chaoyue0130

【摘要】

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目的从基因重组菌中纯化葡萄球菌肠毒素B(SEB)突变体及其野生型蛋白，研究其毒力及抗原性。方法表达野生型SEB蛋白(SEB-N)和SEB突变体(SEB-M23、SEB-150)的3株重组菌经IPTG诱导

【作者】

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俞红钱利生熊思东

【机构】

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复旦大学基础医学院微生物学教研室,复旦大学基础医学院免疫学教研室

【出处】

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复旦学报(医学科学版)

【发表日期】

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2001年3期

【关键词】

：

葡萄球菌肠毒素B 突变性纯化毒力抗原性 Bacteria Bioassay Cell culture Toxic materials

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目的从基因重组菌中纯化葡萄球菌肠毒素B(SEB)突变体及其野生型蛋白，研究其毒力及抗原性。方法表达野生型SEB蛋白(SEB-N)和SEB突变体(SEB-M23、SEB-150)的3株重组菌经IPTG诱导，反复冻融后，制备细菌裂解液。将初步纯化的抗SEB抗血清与CNBr活化的Sepharose 4B作共价偶联，制成亲和层析柱。分柱纯化SEB-N、SEB-M23和SEB-M150蛋白。用SDS-PAGE和酚试剂改良法对纯化蛋白作纯度鉴定和定量；用双向免疫扩散试验和ELISA法作抗原性鉴定；用小鼠致死性试验作毒

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