胡杨PeAPY2基因的克隆及其转化细胞的耐盐性分析

来源 :基因组学与应用生物学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ccj66417
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从胡杨(Populus euphratica Oliv.)抗盐碱能力强于其它种类杨树。本实验室前期对胡杨的研究表明:盐胁迫下,胡杨腺苷三磷酸双磷酸水解酶基因(PeAPY)的转录水平上调,预示该基因可能在胡杨应对盐胁迫中发挥作用。本研究利用RT-PCR方法克隆了胡杨腺苷三磷酸双磷酸水解酶PeAPY2基因,将该基因在烟草BY-2细胞中过表达,分析PeAPY2基因与植物耐盐性的关系。结果证明,PeAPY2编码腺苷三磷酸双磷酸水解酶,其ORF区长为1404 bp,编码467个氨基酸。对转PeAPY2基因的烟草BY-2细胞及野生型烟草BY-2细胞进行长期盐处理,结果表明,烟草BY-2细胞过表达PeAPY2基因后提高了耐盐性,但并没有明显改善由甘露醇(200~600 mmol/L)引起的渗透胁迫。盐处理(50~150 mmol/L, NaCl)2周后,野生型BY-2细胞鲜重和干重都低于转PeAPY2基因的烟草细胞。转基因细胞跟野生型细胞相比,Na+的上升幅度较小,而K+的下降幅度也较小。随着盐胁迫时间的延长,转基因细胞膜透性低于野生型细胞,在盐胁迫下细胞活力高于野生型细胞。说明烟草BY-2细胞过表达PeAPY2基因后改善了其对盐的耐受性,这对深入研究PeAPY2基因在胡杨耐盐机制中的作用具有重要的意义。
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