【摘 要】
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目的:为可乐定临床研究建立一种特异、灵敏、高效的固相萃取(SPE)联合LC-MS/MS定量分析方法。方法:使用200μL血清,加入内标可待因和氨水溶液混匀,使用96孔SPE自动萃取装置进
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医院临床药理中心,
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目的:为可乐定临床研究建立一种特异、灵敏、高效的固相萃取(SPE)联合LC-MS/MS定量分析方法。方法:使用200μL血清,加入内标可待因和氨水溶液混匀,使用96孔SPE自动萃取装置进行样品制备。HPLC色谱柱为Symmetry ShieldRP18(2.1mm×50mm,3.5μm);流动相为甲醇-10mmol.L-1乙酸铵(pH5.3)(65∶35)。采用串联四级杆质谱在ESI正离子电离模式下,应用多反应监测(MRM)进行测定:可乐定m/z230.1→213.1,内标m/z300.3→215.2。分析时间2.0min。结果:在0.10~100.0ng.mL-1的范围内本方法线性良好(r>0.99),最低定量限为0.10ng.mL-1,日内与日间精密度(RSD)≤11.5%,准确度(RE)≤±10.4%,平均萃取回收率为66.4%(n=15)。稳定性实验结果表明,可乐定在不同环境中均能够保持稳定。结论:本文建立了用于血清中可乐定浓度测定的LC-MS/MS方法。该方法高效、灵敏、特异,通过了全面的方法学考察,各项指标均符合要求,已经成功用于可乐定的临床研究。
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