【摘 要】
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目的:探讨芍药醇对缺血再灌注心肌细胞存活的影响,并探讨其机制是否与调控miR-122-5p/谷胱甘肽转移酶M1(GSTM1)分子轴有关.方法:将H9C2细胞分为正常对照(NC)组、缺血/再灌注(
【机 构】
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江汉大学附属医院 武汉市第六医院心血管内科 武汉 430015
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目的:探讨芍药醇对缺血再灌注心肌细胞存活的影响,并探讨其机制是否与调控miR-122-5p/谷胱甘肽转移酶M1(GSTM1)分子轴有关.方法:将H9C2细胞分为正常对照(NC)组、缺血/再灌注(I/R)组、I/R+低-中-高芍药醇组、I/R+anti-miR-con组、I/R+anti-miR-122-5p组、I/R+芍药醇+miR-con组、I/R+芍药醇+miR-122-5p组、I/R+芍药醇+miR-122-5p+pcDNA-con组、I/R+芍药醇+miR-122-5p+pcDNA-GSTM1组,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印记(Western blot)检测miR-122-5p、GSTM1表达;双荧光素酶报告基因实验和Western blot确定miR-122-5p对GSTM1的靶向作用.结果:I/R处理后,H9C2细胞存活率、GSTM1表达降低,miR-122-5p表达升高(P<0.05).芍药醇干预后,H9C2细胞存活率、GSTM1表达升高,miR-122-5p表达降低(P<0.05).抑制miR-122-5p表达后H9C2细胞存活率升高,从而减轻I/R对H9C2细胞的抑制作用(P<0.05).过表达miR-122-5p可逆转芍药醇对I/R处理下H9C2细胞存活的保护作用(P<0.05).过表达GSTM1可逆转miR-122-5p对芍药醇干预的I/R处理下H9C2细胞存活的影响(P<0.05).结论:GSTM1是miR-122-5p的靶基因,miR-122-5p对GSTM1具有负性调控作用.芍药醇可提高I/R条件下心肌细胞存活率,其机制与下调miR-122-5p/GSTM1分子轴有关.
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