三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)微卫星位点的分离和序列分析

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采用磁珠富集法,利用生物素标记的(GT),5寡核苷酸探针从三疣梭子蟹基因组DNA的Sau3A1酶切的500--1000bp片段中筛选微卫星序列。洗脱的杂交片段克隆到PMD18-T载体上构建富集微卫星基因组文库后,通过PCR筛选检测出阳性克隆进行测序。在56条测序序列中有49条非冗余序列包含有重复次数不少于5次的微卫星位点,阳性序列比例达到87.5%。其中perfect类型微卫星最大的重复次数为47次。在47条非冗余序列中,共有40条(85.1%)微卫星重复序列两端有侧翼序列能够进行引物设计。本研究中筛选的
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