【摘 要】
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目的观察性成熟前小鼠的窦前卵泡体外培养的形态学改变,同时评价激素及生长因子等添加物对窦前卵泡体外发育的影响.方法机械法分离性成熟前小鼠卵巢中的窦前卵泡,分2组培养于
【机 构】
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上海市计划生育科学研究所不孕症、试管婴儿中心,上海,200032美国Cornell大学生殖医学和不孕症中心,纽约,10021;
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目的观察性成熟前小鼠的窦前卵泡体外培养的形态学改变,同时评价激素及生长因子等添加物对窦前卵泡体外发育的影响.方法机械法分离性成熟前小鼠卵巢中的窦前卵泡,分2组培养于20μL培养液滴内.(1)Gn组:α-MEM+10%FCS+100 mU/mL rFSH+ITS(5 xg/mL insulin,5 μg/mL transferrine,5 ng/mLselenium)±10 mU/mLrLH,第12天移入α-MEM+1.5 U/mL rHCG+5 ng/mL rEGF+10%FCS.(2)nGn组:α-MEM+10%FCS.每天换液观察,记录GC增生、窦形成等形态学改变和卵母细胞成熟情况.结果激素组窦前卵泡增长明显,92.92%存活,28.65%形成窦,培养14d后40.35%排出成熟卵;而无激素组窦前卵泡生长缓慢,生存6 d后开始萎缩、变黑,存活率仅10.91%,无窦卵泡形成,仅11.11%排出成熟卵,差异有显著意义(P＜0.01).激素组在添加ITS、LH后,窦前卵泡的窦形成率和排出成熟卵母细胞率均显著上升(P＜0.05).结论α-MEM可作为窦前卵泡体外培养液,但必须添加rLH/rFSH、ITS、rHCG/rEGF以促进膜细胞黏附、颗粒细胞增生和卵母细胞成熟.
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