【摘 要】
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根据大肠杆菌的特异性基因(malB),设计与筛查环介导等温扩增(LAMP)的引物,通过对甜菜碱用量、环引物的浓度、反应温度、dNTPs用量等反应条件的优化,得到较佳的LAMP反应体系,
【机 构】
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湖南工业大学生物医用纳米材料与器件湖南省重点实验室
【基金项目】
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湖南省重点研发计划基金资助项目(2017SK2174),国家自然科学基金资助项目(61871180),中国博士后科学基金一等资助项目(2018M630498).
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根据大肠杆菌的特异性基因(malB),设计与筛查环介导等温扩增(LAMP)的引物,通过对甜菜碱用量、环引物的浓度、反应温度、dNTPs用量等反应条件的优化,得到较佳的LAMP反应体系,建立了LAMP实时浊度法快速检测大肠杆菌;在较优条件下,先后对9株非大肠杆菌菌株进行特异性检测和5株大肠杆菌的进行同源性检测。此外,结合课题组自行研制的多通道浊度仪,对LAMP扩增产物进行实时浊度监测。结果表明:LAMP实时浊度法检测大肠杆菌的灵敏度达16.010ng/L,与实时荧光定量PCR的检测限相当。因此,建立与优化L
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