【摘 要】
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把黄瓜花叶病毒(CMV)西番莲分离物的外壳蛋白(CP)基因,通过BamHI/SacI位点定向插入pET-22b(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导下37℃培养6h,SDS-PAGE电泳示表达蛋白
【机 构】
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中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室
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把黄瓜花叶病毒(CMV)西番莲分离物的外壳蛋白(CP)基因,通过BamHI/SacI位点定向插入pET-22b(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导下37℃培养6h,SDS-PAGE电泳示表达蛋白分子质量为31.8kDa,表达量占菌体总蛋白的28.9%,表明该蛋白得到了高效表达.用冰冷的氯化钾溶液显色,用表达的特异蛋白质条带制备抗原,免疫家兔制备出病毒特异抗血清.采用ID-ELISA测定抗血清效价为10-6;抗血清和CMV几个分离物均有特异反应,和TMV、菌体蛋白不发生非特异性反应;
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