赖氨酸去甲基化酶2A全长及截短重组质粒构建及其在细胞中的定位

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目的:构建赖氨酸去甲基化酶2A(lysine demethylase 2A,KDM2A)全长及截短重组表达质粒,并初步探究其在前列腺癌CWR22Rv1细胞中的定位及机制。方法:根据KDM2A的mRNA编码序列及蛋白结构域特点设计合成KDM2A全长及截短表达序列的引物,以含有KDM2A全长编码序列的质粒作为模板,通过PCR扩增目的片段,再用限制性内切酶NotⅠ和XbaⅠ进行双酶切,连接转化后,挑取单克隆菌落扩增,并提取质粒进行酶切鉴定及测序比对。将序列比对正确的KDM2A全长及截短重组质粒转染到HEK293
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