大鼠Nogo受体基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定

来源 :第二军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shihaiquanhanhan
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目的:构建大鼠Nogo受体(Nogo receptor,NgR)基因RNA干扰慢病毒表达载体,并观察其对293T细胞感染效率。方法:应用基因工程技术,首先构建携带目的基因siNgR199的慢病毒穿梭质粒表达载体,然后使用慢病毒包装质粒混合物和构建好的慢病毒穿梭质粒共转染293T细胞,转染48h后收集上清离心过滤后冰浴保存,最后进行病毒滴度测定,与标准病毒液分别感染293T细胞,按MOI值分为5个梯度:1、3、5、10、20,以确定病毒滴度及适合感染的MOI值。其中采用PCR方法对重组载体进行鉴定,利用绿色
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