黄芩素对UVB诱导HaCaT细胞光老化及相关p38信号通路的影响

来源 :中国实验方剂学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:money2468
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目的:研究黄芩素对中波紫外线(UVB)诱导人皮肤角质形成细胞(HaCaT)光老化及相关p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的影响。方法:选择1×10-11,1×10-10,1×10-9,1×10-8,1×10-7,1×10-6,1×10-5,1×10-4,1×10-3mol·L-19种浓度黄芩素作用于HaCaT细胞,噻唑蓝(MTT)法筛选出最佳有效浓度。经预实验筛选出辐射强度为0.5 mW·cm-2的UVB,辐射时间为5 min建立光老化模型,筛选出最佳有效浓度作用于光老化模型,另设空白组MTT法检测各组细胞活性。超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),过氧化氢酶(CAT)及丙二醛(MDA)试剂盒检测SOD,GSH-Px,CAT活性及MDA含量。实时定量荧光定量聚合酶连式反应(RT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测各组细胞中mRNA及蛋白表达。结果:筛选出1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1黄芩素为最佳有效浓度;与空白组比较,UVB组对HaCaT细胞无明显的增殖作用。与UVB组比较,1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1黄芩素组对光老化模型无明显增殖作用。与空白组比较,UVB组SOD,GSH-Px及CAT活性明显的降低,MDA含量显著升高(P<0.01);与UVB组比较,1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1黄芩素组SOD,GSH,CAT活性明显升高,MDA含量明显降低(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,UVB组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA及TNF-α,磷酸化p38(p-p38)蛋白表达显著升高(P<0.01);与UVB组比较,1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1黄芩素组TNF-αmRNA及TNF-α,p-p38蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芩素对UVB诱导HaCaT细胞光老化保护作用主要是通过提高氧化酶活性以及阻断p38MAPK信号通路,抑制炎症因子产生。
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