【摘 要】
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为了实现该细菌素的外源表达,本实验首先利用聚合酶链式反应从乳酸片球菌PAF中扩增出乳酸片球菌素PA-1的结构和免疫基因,然后克隆到表达载体p GEX-6p-1,构建了N端含有GST-His
【机 构】
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南京财经大学食品科学与工程学院,江南大学食品学院
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（31271930）, 江苏省研究生培养创新工程项目（KYLX_1167）, 江苏高校优势学科建设工程资助项目（PAPD）, 江苏省普通高校研究生科研创新计划项目（CXZZ13_0636）
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为了实现该细菌素的外源表达,本实验首先利用聚合酶链式反应从乳酸片球菌PAF中扩增出乳酸片球菌素PA-1的结构和免疫基因,然后克隆到表达载体p GEX-6p-1,构建了N端含有GST-His-DDDDK标签的重组质粒p GEX/his-ped AB,然后转化进入大肠杆菌Rosetta（DE3）感受态细胞,经异丙基硫代半乳糖苷诱导,重组乳酸片球菌素PA-1在大肠杆菌胞内成功表达。表达的融合蛋白先经过镍亲合层析柱纯化,然后注入谷胱甘肽S-转移酶亲和色谱柱用肠激酶处理,释放出成熟的乳酸片球菌素PA-1。利用高效液
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