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目的观察精浆miR-34b、miR-122-3p和miR-141-5p在男性不育各中医证型中的表达特征,为男性不育中医证型的辩证论治提供一种分子标志物。方法选择男性不育患者141例,依照中医辨证分型标准又分为肾阳虚证21例,肾阴虚证43例,痰湿内蕴证37例,肝郁血瘀证40例。另外选择生育力评估正常的健康男性30例为对照组。统计分析各组精液常规质量参数及精浆miR-34b、miR-122-3p、miR-141-5p表达的差异。精子浓度及前向运动精子百分率用计算机辅助精子分析系统,精子存活率用低渗膨胀实验,精子形态采用Diff-Quick染色法,精浆microRNA(miRNA)表达用实时荧光定量RT-PCR。结果肾阳虚组精子浓度(52.37±15.31)×10~6/mL较其他中医证型显著下调(P<0.05)。肝郁血瘀证精子存活率(31.41±10.38)%和前向运动精子百分率(24.18±4.65)%较其他中医证型降低(P<0.05或P<0.01),正常形态精子(3.21±1.68)%较肾阴虚证及痰湿内蕴证显著降低(P<0.01)。肾阴虚证精液液化时间(36.13±10.91)min较肾阳虚证及痰湿内蕴证明显延长(P<0.05)。各组间精浆miR-34b、miR-122-3p和miR-141-5p表达均有非常显著性差异(P均<0.01)。肾阳虚证miR-34b较其他各组显著下调(P均<0.01)。肝郁血瘀证miR-122-3p较肾阴虚证及痰湿内蕴证显著下调(P<0.05),肝郁血瘀证miR-141-5p较肾阳虚证、肾阴虚证及痰湿内蕴证显著上调(P<0.05或P<0.01)。绘制ROC曲线,精浆miR-34b和miR-141-5p对肾阳虚证的诊断价值分别为ROCAUC=0.940(0.893~0.986,95%)和ROCAUC=0.674(0.557~0.792,95%),在最佳截断值下,其敏感度和特异度分别为(90.0%,81.0%)和(62.0%,76.2%)。3种精浆miRNA对肾阴虚证及痰湿内蕴证ROCAuC均<0.50。miR-34b、miR-122-3p和miR-141-5P对肝郁血瘀证的ROCAUC分别0.698(0.617~0.779,95%)、0.773(0.684~0.863,95%)和0.753(0.657~0.849,95%),在最佳截断值下,其诊断肝郁血瘀证敏感度和特异度分别为(69.5%,65.0%)、(81.7%,65.0%)和(70.2%,70.0%)。不育组3种精浆miRNA与精液常规质量参数均呈一定程度的相关性。结论 miRNA在男性不育不同的中医证型疾病发生过程中发挥的作用不同,miR-34b可作为肾阳虚证的特征性分子标志物,miR-122-3p和miR-141-5p可作为肝郁血瘀证的特征性分子标志物。