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人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因Oct4的克隆及其在大肠杆菌中的表达

来源 :第二军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：qqqqq770627

【摘 要】

：

目的:克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4,并使其在大肠杆菌中表达.方法:取4～6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜,利用RT-PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA,并插入到原核表达载

【作 者】

：

刘善荣 王庆敏 杨玲 汤淑萍 惠宁 蒋正 戚中田 刘厚奇 

【机 构】

：

第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室,基础医学部医学遗传学教研室,长海医院妇产科,基础医学部微生物学教研室

【出 处】

：

第二军医大学学报

【发表日期】

：

2003年9期

【关键词】

：

人胚生殖嵴干细胞 多能性调节基因 OCT4 克隆 基因克隆 基因表达 embryonic germ cell Oct4 gene clone  gene exp 

【基金项目】

：

National Foundation for Outstanding Young Scientist，Cooperation Foundation for overseas Young Scientist

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目的:克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4,并使其在大肠杆菌中表达.方法:取4～6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜,利用RT-PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA,并插入到原核表达载体pGEX5T中,构建成 pGEX5T-Oct4重组质粒.β硫代半乳糖苷(IPTG)诱导使该基因在k802菌中表达.结果:用PCR方法扩增获得大小约1.1 kb条带;全自动测序与GenBank中登录的序列97%同源.获得了pGEX5T-Oct4 重组子并在k802菌中获得了表达,SDS-PAGE分析有一特异性的62 00

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