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目的 表达2型单纯疱疹病毒(HSV-2)糖蛋白G免疫优势片段gG321-580,探讨重组gG321-580作为检测HSV-2特异性IgG诊断抗原的可行性,为进一步开发诊断试剂盒奠定基础.方法 整合有gG321-580基因的重组杆状病毒接种Sf9昆虫细胞,NTA-Ni2+纯化表达His-gG321-580融合蛋白.应用HSV-2感染Vero细胞,制备HSV-2病毒抗原.将gG321-580蛋白和HSV-2病毒抗原分别作为包被抗原,建立间接ELISA法(gG321-580-ELISA和病毒抗原-ELJSA).分别用gG321-580-ELISA和病毒抗原-ELISA检测105份临床样本,两者的检测结果以HerpeSelect 2 ELISA IgG试剂盒作为金标准,在特异性、灵敏性和符合率等方面进行比较.结果 SDS-PAGE和Western印迹结果显示,表达的gG321-580蛋白相对分子质量约为60000,具有良好的免疫学活性.与HerpeSelect 2 ELISA IgG试剂盒相比,gC321-580-ELISA的灵敏度、特异度、符合率分别为83.3%、81.8%、82.9%,病毒抗原-ELISA的灵敏度、特异性和符合率分别为20.8%、93.9%、43.8%.gG321-580-ELISA敏感度和符合率高于病毒抗原-ELISA.结论 表达的HSV-2重组gG321-580蛋白作为包被抗原的ELISA法是一种敏感、特异的方法,具有较大的应用价值。