【摘 要】
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目的应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建丙型肝炎病毒(HCV)E1蛋白反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HCV E1蛋白反式激活相关基因.方法以HCV E1表达质粒pcDNA3.1(-)-E1转
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目的应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建丙型肝炎病毒(HCV)E1蛋白反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HCV E1蛋白反式激活相关基因.方法以HCV E1表达质粒pcDNA3.1(-)-E1转染肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;制备转染后的细胞裂解液,从中提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaI酶切后将实验组cDNA分成2组,分别与2种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行2次消减杂交及2次抑制性PCR,将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染
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