【摘 要】
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目的 探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的体外构建表达神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的能力,同时使MSCs被绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)稳定标记,通过病毒载体将NGF和GFP基因高效转染到MSCs中. 方法 取2月龄100～150 g Wistar大鼠,全骨髓法分离培养纯化大鼠
【机 构】
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430071,武汉市,武汉大学中南医院骨科，郧阳医学院附属人民医院显微骨科,430071,武汉市,武汉大学中南医院骨科,郧阳医学院附属人民医院显微骨科,郧阳医学院附属人民医院显微骨科,郧阳医学院附属人
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目的 探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的体外构建表达神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的能力,同时使MSCs被绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)稳定标记,通过病毒载体将NGF和GFP基因高效转染到MSCs中. 方法 取2月龄100～150 g Wistar大鼠,全骨髓法分离培养纯化大鼠MSCs,利用携带人NGFB基因的修复缺陷性重组腺病毒(Ad-hNGFβ)和携带GFP基因的复制缺陷性逆转录病毒(Rt-GFP)转染MSCs,荧光显微镜观察GFP阳性的MSCs,免疫细胞化学和Western-blot检测hNGFβ的表达. 结果 Rt-GFP转染后,80%～90%MSCs可激发出明亮的绿色荧光,且荧光不随培养时间延长和传代次数增加而衰减.Ad-hNGFβ的转染MSCs中hNGFβ阳性率(90.17±2.14)显著高于阴性对照组(2.17±0.75)和空白对照组(1.83±0.98,P＜0.01),转染后MSCs中NGFβ表达量(188.67±8.71)显著高于阴性对照组(25.67±4.08)和空白对照组(27.50±3.33,P＜0.01). 结论 大鼠间充质干细胞的体外构建中Ad-hNGFβ可以高效转染MSCs,实现NGF在MSCs中高效表达,Rt-GFP可以使MSCs获得长效标记。
其他文献
我院自2001年以来,采用甲床回植、皮瓣转移包埋寄养,二期剥离皮瓣解放甲床的方法治疗小儿甲床连同指端软组织剥脱伤6例,年龄3～11岁.分别为拇指、示指、中指损伤,甲床连同指端软组织剥脱伤,末节指骨外露,骨膜覆盖,甲床不同程度挫伤但无毁损,2例甲根残留。
目的 探讨动静脉内瘘的手术方法并总结其临床效果. 方法 对慢性肾功能衰竭施行动静脉内瘘术985例,其中前臂动静脉内瘘术中,前臂动静脉703例,头静脉与桡动脉端-侧或端-端连续外翻吻合;肘部自体动静脉内瘘198例,头静脉、贵要静脉或肘正中静脉与肱动脉行端-侧连续外翻吻合;PTFE人造血管内瘘84例,前臂作"U"形皮下隧道,置入PTFE人造血管20～35cm,动脉端人造血管与肱动脉行端-侧吻合,静脉端
缺损区周围缺乏可供吻合的血管时,如何采用游离皮瓣移植修复创面是一个比较棘手的问题.我们自2001-2004年用桥式交叉皮瓣治疗小腿大面积软组织缺损16例,报道如下。
三叉神经痛(TN)是一种顽固性面部疼痛,自从Dandy率先提出TN的神经血管压迫理论以来,显微血管减压术(MVD)已成为治疗TN最为有效的方法.自1995年至2003年,我科采用MVD治疗TN共22例,取得了显著的疗效,报道如下。
目的 报道拇指软组织缺损的皮瓣修复方法及临床效果.方法根据拇指软组织缺损的不同情况,采用6种小皮瓣进行修复,包括拇指桡侧指动脉逆行岛状皮瓣、拇指尺背动脉逆行皮瓣、第一掌背动脉逆行皮瓣,示指背侧岛状皮瓣、带神经血管蒂的V-Y推进皮瓣以及躅甲瓣等.临床应用132例,共137个皮瓣.结果术后有5例皮瓣出现表皮小部分坏死,经换药处理后愈合,其余均成活.随访1～2年,拇指功能、外形满意.结论对拇指软组织缺损
患者男,26岁.2003年2月因匕首刺伤左腹部及左大腿,在当地医院急诊行剖腹探查、部分空肠切除吻合、左大腿清创术.伤后1个月因左大腿股四头肌萎缩、肌力0级再次行左大腿股神经探查术,未见股神经损伤.伤后2个月来我院就诊.检查见左腹部脐旁左下方及左大腿近侧前正中有刀刺伤口和手术瘢痕,左股四头肌萎缩、肌力0级,主动伸膝功能丧失,左大腿前侧及左小腿前内侧股神经支配区感觉减退。
手指末节指腹离断较为少见,对指腹比较完整、指腹内有可供吻合的动、静脉者,可应用显微外科技术施行再植.1998至2001年本组共再植6例,全部成活,外形及功能良好。
中国人民解放军401医院手外科组建于1981年，1985年经总后卫生部批准正式成为全军手外科医学专科中心。该中心全面开展并拓宽手外科、显微外科等医疗、教学、科研工作，并取得了显著成绩，尤其在手指再植与再造方面形成了技术优势为特色。已成为我国一支有实力的手外科、显微外科技术队伍。
伴有肌腱、骨骼外露的前足软组织缺损修复十分棘手,随着显微外科的深入发展,应用显微外科技术进行修复,可获得良好的临床效果[1].应用足跗外侧动脉逆行岛状皮瓣修复前足损伤,可取得满意效果,该皮瓣在逆行转移时明显弥补了血管蒂长度不足,使皮瓣的适用范围严重受限.2005年以来,应用此皮瓣3例,全部成功,疗效满意。
目的 探讨下肢严重开放性损伤的显微外科修复及临床疗效. 方法对下肢损伤根据Gustil和Andserson分类ⅢB 16例、ⅢC 29例,采用显微外科技术修复结合稳定的固定方法和损伤肢体部位筋膜间室广泛切开减压进行治疗. 结果 38例43肢存活,7例二期截肢.全部病例随访5～60个月,骨折愈合,无骨关节感染发生,组织瓣全部成活,质地与色泽较好;存活肢体外形与功能满意16例,基本满意20例,不满意2