新型离子液体亲和萃取鸡蛋清中的溶菌酶

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建立并优化利用辛巴蓝(Cibacron Blue F-3GA,CB)修饰[C4MIM]Cl的新型离子液体[C4MIM]3CB特异性萃取分离鸡蛋清中溶菌酶的方法,并采用AutoDock Vina分析[C4MIM]3CB与蛋白的结合能,研究溶菌酶与[C4MIM]3CB相结合的能力。通过亲和萃取和反萃取并进一步脱盐、浓缩、冷冻干燥,得到溶菌酶产品。结果表明,通过对影响因素的研究,优化出最佳的萃取分离条件:蛋清粉溶液pH为7,新型离子液体中[C4MIM]3[CB]浓度为8 mg/mL,反应震荡时间为15 min,反萃取KCl溶液pH为7.0,浓度为1.5 mol/L。最终250 mg蛋清粉可得12.3 mg的溶菌酶产品,纯度为97.56%,酶活力为35000 U/mg,纯化倍数达到37.39,酶活回收率89.74%,且与其他蛋白达到完全分离。该方法具有选择性高、操作简便、产物纯度和活性高等优点。
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