盐芥激活标签突变体库的构建

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[目的] 在功能基因组水平上从正向遗传学和反向遗传学两方面研究盐芥的功能基因及其作用机制和相关信号通路.[方法] 以双子叶耐盐植物盐芥的山东野生生态型植株为材料,采用激活标签法,以含有激活标记质粒pSKI015的农杆菌进行转化,并以除草剂Basta为筛选标记,构建盐芥的激活标记突变体库.[结果] 带有激活标签载体的农杆菌在保存时会失去CaMV 35 S增强子的4个拷贝.1~2个星期后,农杆菌平均失去CaMV 35 S的一个拷贝,1个月后,只剩下单一拷贝.菌种的PCR产物的电泳结果包括一条长度为1.46 kb的特异条带.转化种子播种到土壤中,长出两片真叶后喷洒0.2%Basta溶液,1星期后仍然保持绿色并正常生长.[结论] 该研究为理解植物的生长发育、代谢及其与环境的相互作用奠定了基础.
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