【摘 要】
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[目的]筛选血管内皮生长因子受体(VEGRF)基因特异性小干扰RNA(Small Interference RNA,siRNA),为肿瘤等疾病的基因治疗寻找一种新途径. [方法]以高表达 VEGFR1的人脐静脉血管
【机 构】
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中国科学院华南植物园,中国科学院广州生物医药与健康研究院,中国科学院研究生院
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划);
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[目的]筛选血管内皮生长因子受体(VEGRF)基因特异性小干扰RNA(Small Interference RNA,siRNA),为肿瘤等疾病的基因治疗寻找一种新途径. [方法]以高表达 VEGFR1的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)为模型,采用RNA干扰技术,化学合成了3条针对血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)的特异性siRNA,用Lipofectamine2000 TM转染HUV EC细胞株,通过Real time RT-PCR技术检测HUVEC细胞VEG FR1基因mRNA的表达.并对效果最好的VEGFR1 siRNA-2进行siRNA的浓度梯度效果检测.[结果]结果表明,与对照组相比,所设计的3条siRNA均能不同程度地抑制VEGFR1 mRNA的表达, 其中siRNA-2号最有效,浓度为50 nmol/L时抑制率达到95％左右.在浓度梯度试验中, VEGFR1 siRNA-2转染浓度为50 pmol/L时,对VEGFR1基因的沉默效果还能达到50％左右.[结论] 所设计的siRNA能有效抑制VEGFR1基因的表达,为RNAi用于靶向VEGFR1的基因治疗提供了非常有效的siRNA序列.
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