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摘 要：为了确定猪伪狂犬病灭活疫苗（PRVSX-gE株）对怀孕母猪的安全性及繁殖性能的影响，本研究选用3批疫苗对怀孕母猪进行一次单剂量接种、单剂量重复接种及一次超剂量接种的试验。结果显示，肌内注射猪伪狂犬病灭活疫苗（PRVSX-gE株）后，母猪接种部位及全身无不良反应，母猪健康，妊娠正常，無死胎和木乃伊胎，新生仔猪生长发育良好。试验表明，自主研制的猪伪狂犬病灭活疫苗（PRVSX-gE株）对怀孕母猪安全，对怀孕母猪繁殖性能无影响。
关键词：猪伪狂犬病;灭活疫苗;安全性试验;繁殖性能
中图分类号：S855 文献标志码：A 文章编号：1001-0769（2021）05-0032-04
伪狂犬病是由伪狂犬病病毒（pseudorabiesvirus，PRV）引起的多种家畜和野生动物以发热、奇痒及脑脊髓炎为主要症状的一种传染病[1]。人感染伪狂犬病病毒从20世纪80年代以来陆续有报道[2]，2019年，翁珊珊等报道在人眼晶状体中发现伪狂犬病病毒[3]。该病在欧洲、北美洲、南美洲、亚洲和非洲均有暴发，我国于1947年首次报道了猫发生该病[1]，之后扩大到全国，2011年全国各地相继出现猪伪狂犬病病毒的变异毒株，给我国养猪业带来巨大的经济损失。
本试验通过给怀孕母猪一次单剂量、单剂量重复及一次超剂量接种猪伪狂犬病灭活疫苗，以检验该疫苗对怀孕母猪的安全性，为疫苗的规模生产及推广应用提供参考数据。
1 材料
1.1 试验疫苗
试验疫苗为猪伪狂犬病灭活疫苗（PRVSX-gE株）（生产批号为2017001、2017002、2018001），由上海市农业科学院畜牧兽医研究所繁殖障碍课题组试制。
1.2 PRV阻断ELISA诊断试剂盒
猪伪狂犬病病毒gB抗体检测试剂盒及猪伪狂犬病病毒gE抗体检测试剂盒为IDEXX公司生产。
1.3 试验动物及饲料
PRV抗原、抗体阴性怀孕母猪来自江苏省某猪场。饲料来自上海千里生物科技有限公司。
1.4 动物房及其他
动物房经消毒后使用。其他物品均由上海市农业科学院畜牧兽医研究所提供。
2 方法
2.1 一次单剂量接种
试验组按疫苗的生产批次分为3组，每组5头怀孕母猪，产前7周颈部肌内注射猪伪狂犬病灭活疫苗（PRVSX-gE株），2 mL/头;对照组选取5头怀孕母猪，颈部肌内注射生理盐水，2 mL/头。接种后连续观察至所产仔猪断奶。统计每头母猪的总产仔数、产活仔数、死胎数、弱胎数等，对新生仔猪及断奶仔猪进行称重。
2.2 单剂量重复接种
试验组按疫苗生产批次分为3组，每组 5头怀孕母猪，产前7周颈部肌内注射猪伪狂犬病灭活疫苗（PRVSX-gE株），2 mL/头;对照组选取5头怀孕母猪，颈部肌内注射生理盐水，2 mL/头。21 d后对怀孕母猪进行第2次免疫，免疫剂量同首次免疫。接种后连续观察至所产仔猪断奶。统计每头母猪的总产仔数、产活仔数、死胎数、弱胎数等，对新生仔猪及断奶仔猪进行称重。
2.3 一次超剂量接种
试验组按疫苗生产批次分为3组，每组 5头怀孕母猪，产前7周颈部肌内注射猪伪狂犬病灭活疫苗（PRVSX-gE株），4 mL/头;对照组选取5头怀孕母猪，颈部肌内注射生理盐水，4 mL/头。接种后连续观察至所产仔猪断奶。统计每头母猪的总产仔数、产活仔数、死胎数、弱胎数等，对新生仔猪及断奶仔猪进行称重。
3 结果
3.1 对怀孕母猪一次单剂量接种的安全性
试验组和对照组怀孕母猪的接种部位及全身均无不良反应，母猪健康，妊娠正常，无死胎和木乃伊胎等，新生仔猪发育良好。3个试验组的怀孕母猪的总产仔数分别为53头、55头、50头，对照组怀孕母猪的总产仔数为52头;3个试验组的怀孕母猪所产仔猪的平均初生重分别为（1.41±0.33）kg、（1.42±0.23）kg、 （1.49±0.35）kg，对照组怀孕母猪所产仔猪的平均初生重为（1.46±0.42）kg;3个试验组的怀孕母猪所产仔猪的平均断奶体重分别为（7.42±0.46）kg、（7.32±0.6）kg、（7.52±0.32）kg，对照组怀孕母猪所产仔猪的平均断奶体重为（7.45±0.35）kg。结果见表1和表2。
3.2 对怀孕母猪单剂量重复接种的安全性
试验组和对照组怀孕母猪的接种部位及全身均无不良反应，母猪健康，妊娠正常，无死胎和木乃伊胎等，新生仔猪发育良好。3个试验组的怀孕母猪的总产仔数分别为51头、54头、52头，对照组怀孕母猪的总产仔数为50头;3个试验组的怀孕母猪所产仔猪的平均初生重分别为（1.48±0.24）kg、（1.50±0.31）kg、 （1.41±0.28）kg，对照组怀孕母猪所产仔猪的平均初生重为（1.47±0.19）kg;3个试验组的怀孕母猪所产仔猪的平均断奶体重 分别为（7.48±0.25）kg、（7.40±0.33）kg、（7.39±0.25）kg，对照组怀孕母猪所产仔猪的平均断奶体重为（7.44±0.21）kg。结果见表3和表4。
3.3 对怀孕母猪一次超剂量接种的安全性 试验组和对照组怀孕母猪的接种部位及全身均无不良反应，母猪健康，妊娠正常，无死胎和木乃伊胎等，新生仔猪发育良好。3个试验组的怀孕母猪的总产仔数分别为51头、49头、53头，对照组怀孕母猪的总产仔数为51头;3个试验组的怀孕母猪所产仔猪的平均初生重分别为（1.51±0.25）kg、（1.40±0.19）kg、 （1.46±0.24）kg，对照组怀孕母猪所产仔猪的平均初生重为（1.44±0.15）kg;3个试验组的怀孕母猪所产仔猪的平均断奶体重 分别为（7.91±0.23）kg、（7.27±0.21）kg、（7.18±0.32）kg，对照组怀孕母猪所产仔猪的平均断奶体重为（7.55±0.28）kg。试验结果见表5和表6。
4 结果与讨论
对怀孕母猪一次单剂量接种、单剂量重复接种、一次超剂量接种的安全性试验显示，肌内注射猪伪狂犬病灭活疫苗（PRVSX-gE株）后，接种部位及全身无不良反应，母猪健康，妊娠正常，无死胎和木乃伊胎，新生仔猪生长发育良好。试验表明，自主研制的猪伪狂犬病灭活疫苗（PRVSX-gE株）对怀孕母猪安全，不会影响怀孕母猪的繁殖性能。
对PRV的防控目前主要以免疫接种为主。由于猪伪狂犬病病毒毒力基因发生了位点的突变或缺失[4]，猪伪狂犬病病毒流行毒株的毒力增强，利用经典毒株制备的疫苗无法抵抗流行毒株入侵[5]，急需研制流行毒株基因缺失疫苗[6]。本试验对自主研发的猪伪狂犬病流行毒株基因缺失疫苗对怀孕母猪的安全性和繁殖性能进行了评价，结果理想，但大规模应用的效果还需作进一步验证。
参考文献
[1] 殷震.动物病毒学[M].北京：科技出版社，1995：998-1009.
[2] 陈谊，郑明.人猪共患疾病与感染[M].北京：中国农业出版社，2017：23-33.
[3] 翁珊珊，张文宏.人感染伪狂犬病病毒（猪疱疹病毒1型）研究进展[J].传染病信息，2019，32（1）：26-29.
[4] 胡睿铭. 伪狂犬病病毒变异株基因工程疫苗的研制[D]. 武漢：华中农业大学，2016.
[5] 李国新，童光志. 猪伪狂犬病疫苗的研究现状与展望[J]. 中国预防兽医学报，2018，40（9）：858-861.
[6] GU Z Q，DONG J，WANG J C，et al. A novel inactivated gE/gI deleted pseudorabies virus（PRV）vaccine completely protects pigsfrom an emerged variant PRV challenge[J]. Virus Res，2015，195：57-63.
关键词：猪伪狂犬病;灭活疫苗;安全性试验;繁殖性能
中图分类号：S855 文献标志码：A 文章编号：1001-0769（2021）05-0032-04
伪狂犬病是由伪狂犬病病毒（pseudorabiesvirus，PRV）引起的多种家畜和野生动物以发热、奇痒及脑脊髓炎为主要症状的一种传染病[1]。人感染伪狂犬病病毒从20世纪80年代以来陆续有报道[2]，2019年，翁珊珊等报道在人眼晶状体中发现伪狂犬病病毒[3]。该病在欧洲、北美洲、南美洲、亚洲和非洲均有暴发，我国于1947年首次报道了猫发生该病[1]，之后扩大到全国，2011年全国各地相继出现猪伪狂犬病病毒的变异毒株，给我国养猪业带来巨大的经济损失。
本试验通过给怀孕母猪一次单剂量、单剂量重复及一次超剂量接种猪伪狂犬病灭活疫苗，以检验该疫苗对怀孕母猪的安全性，为疫苗的规模生产及推广应用提供参考数据。
1 材料
1.1 试验疫苗
试验疫苗为猪伪狂犬病灭活疫苗（PRVSX-gE株）（生产批号为2017001、2017002、2018001），由上海市农业科学院畜牧兽医研究所繁殖障碍课题组试制。
1.2 PRV阻断ELISA诊断试剂盒
猪伪狂犬病病毒gB抗体检测试剂盒及猪伪狂犬病病毒gE抗体检测试剂盒为IDEXX公司生产。
1.3 试验动物及饲料
PRV抗原、抗体阴性怀孕母猪来自江苏省某猪场。饲料来自上海千里生物科技有限公司。
1.4 动物房及其他
动物房经消毒后使用。其他物品均由上海市农业科学院畜牧兽医研究所提供。
2 方法
2.1 一次单剂量接种
试验组按疫苗的生产批次分为3组，每组5头怀孕母猪，产前7周颈部肌内注射猪伪狂犬病灭活疫苗（PRVSX-gE株），2 mL/头;对照组选取5头怀孕母猪，颈部肌内注射生理盐水，2 mL/头。接种后连续观察至所产仔猪断奶。统计每头母猪的总产仔数、产活仔数、死胎数、弱胎数等，对新生仔猪及断奶仔猪进行称重。
2.2 单剂量重复接种
试验组按疫苗生产批次分为3组，每组 5头怀孕母猪，产前7周颈部肌内注射猪伪狂犬病灭活疫苗（PRVSX-gE株），2 mL/头;对照组选取5头怀孕母猪，颈部肌内注射生理盐水，2 mL/头。21 d后对怀孕母猪进行第2次免疫，免疫剂量同首次免疫。接种后连续观察至所产仔猪断奶。统计每头母猪的总产仔数、产活仔数、死胎数、弱胎数等，对新生仔猪及断奶仔猪进行称重。
2.3 一次超剂量接种
试验组按疫苗生产批次分为3组，每组 5头怀孕母猪，产前7周颈部肌内注射猪伪狂犬病灭活疫苗（PRVSX-gE株），4 mL/头;对照组选取5头怀孕母猪，颈部肌内注射生理盐水，4 mL/头。接种后连续观察至所产仔猪断奶。统计每头母猪的总产仔数、产活仔数、死胎数、弱胎数等，对新生仔猪及断奶仔猪进行称重。
3 结果
3.1 对怀孕母猪一次单剂量接种的安全性
试验组和对照组怀孕母猪的接种部位及全身均无不良反应，母猪健康，妊娠正常，无死胎和木乃伊胎等，新生仔猪发育良好。3个试验组的怀孕母猪的总产仔数分别为53头、55头、50头，对照组怀孕母猪的总产仔数为52头;3个试验组的怀孕母猪所产仔猪的平均初生重分别为（1.41±0.33）kg、（1.42±0.23）kg、 （1.49±0.35）kg，对照组怀孕母猪所产仔猪的平均初生重为（1.46±0.42）kg;3个试验组的怀孕母猪所产仔猪的平均断奶体重分别为（7.42±0.46）kg、（7.32±0.6）kg、（7.52±0.32）kg，对照组怀孕母猪所产仔猪的平均断奶体重为（7.45±0.35）kg。结果见表1和表2。
3.2 对怀孕母猪单剂量重复接种的安全性
试验组和对照组怀孕母猪的接种部位及全身均无不良反应，母猪健康，妊娠正常，无死胎和木乃伊胎等，新生仔猪发育良好。3个试验组的怀孕母猪的总产仔数分别为51头、54头、52头，对照组怀孕母猪的总产仔数为50头;3个试验组的怀孕母猪所产仔猪的平均初生重分别为（1.48±0.24）kg、（1.50±0.31）kg、 （1.41±0.28）kg，对照组怀孕母猪所产仔猪的平均初生重为（1.47±0.19）kg;3个试验组的怀孕母猪所产仔猪的平均断奶体重 分别为（7.48±0.25）kg、（7.40±0.33）kg、（7.39±0.25）kg，对照组怀孕母猪所产仔猪的平均断奶体重为（7.44±0.21）kg。结果见表3和表4。
3.3 对怀孕母猪一次超剂量接种的安全性 试验组和对照组怀孕母猪的接种部位及全身均无不良反应，母猪健康，妊娠正常，无死胎和木乃伊胎等，新生仔猪发育良好。3个试验组的怀孕母猪的总产仔数分别为51头、49头、53头，对照组怀孕母猪的总产仔数为51头;3个试验组的怀孕母猪所产仔猪的平均初生重分别为（1.51±0.25）kg、（1.40±0.19）kg、 （1.46±0.24）kg，对照组怀孕母猪所产仔猪的平均初生重为（1.44±0.15）kg;3个试验组的怀孕母猪所产仔猪的平均断奶体重 分别为（7.91±0.23）kg、（7.27±0.21）kg、（7.18±0.32）kg，对照组怀孕母猪所产仔猪的平均断奶体重为（7.55±0.28）kg。试验结果见表5和表6。
4 结果与讨论
对怀孕母猪一次单剂量接种、单剂量重复接种、一次超剂量接种的安全性试验显示，肌内注射猪伪狂犬病灭活疫苗（PRVSX-gE株）后，接种部位及全身无不良反应，母猪健康，妊娠正常，无死胎和木乃伊胎，新生仔猪生长发育良好。试验表明，自主研制的猪伪狂犬病灭活疫苗（PRVSX-gE株）对怀孕母猪安全，不会影响怀孕母猪的繁殖性能。
对PRV的防控目前主要以免疫接种为主。由于猪伪狂犬病病毒毒力基因发生了位点的突变或缺失[4]，猪伪狂犬病病毒流行毒株的毒力增强，利用经典毒株制备的疫苗无法抵抗流行毒株入侵[5]，急需研制流行毒株基因缺失疫苗[6]。本试验对自主研发的猪伪狂犬病流行毒株基因缺失疫苗对怀孕母猪的安全性和繁殖性能进行了评价，结果理想，但大规模应用的效果还需作进一步验证。
参考文献
[1] 殷震.动物病毒学[M].北京：科技出版社，1995：998-1009.
[2] 陈谊，郑明.人猪共患疾病与感染[M].北京：中国农业出版社，2017：23-33.
[3] 翁珊珊，张文宏.人感染伪狂犬病病毒（猪疱疹病毒1型）研究进展[J].传染病信息，2019，32（1）：26-29.
[4] 胡睿铭. 伪狂犬病病毒变异株基因工程疫苗的研制[D]. 武漢：华中农业大学，2016.
[5] 李国新，童光志. 猪伪狂犬病疫苗的研究现状与展望[J]. 中国预防兽医学报，2018，40（9）：858-861.
[6] GU Z Q，DONG J，WANG J C，et al. A novel inactivated gE/gI deleted pseudorabies virus（PRV）vaccine completely protects pigsfrom an emerged variant PRV challenge[J]. Virus Res，2015，195：57-63.