结缔组织生长因子反义寡核苷酸对肾小管上皮细胞纤溶酶原激活物抑制物1表达的影响

来源 :中华肾脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:haoliangli
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目的 探讨结缔组织生长因子(CTGF)反义寡核苷酸(ODN)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)mRNA表达和蛋白产生的影响,以明确CTGF在肾脏细胞外基质(ECM)降解中的作用.方法体外培养人近曲小管上皮细胞(HKC),以脂质体介导方法将CTGF反义ODN转染细胞.以TGF-β1(5μg/L)刺激HKC不同时间后,用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测PAI-1 mRNA表达;流式细胞仪法检测胞内PAI-1蛋白合成;Westem印迹方法检测HKC分泌到上清中的PAI-1蛋白含量.结果TGF-β1可诱导HKC高表达CTGF和PAI-1.转染后6 h,CTGF反义ODN可显著抑制TGF-β1诱导的HKC PAI-1 mRNA表达.转染后24 h,CTGF反义ODN可明显抑制胞内PAI-1蛋白合成,并减少了HKC分泌到胞外的PAI-1.结论CTGF在肾小管间质纤维化时ECM降解中起了关键调控作用,其反义ODN的导入可能是延缓肾小管间质纤维化的有效手段之一。

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