论文部分内容阅读
目的利用在大肠杆菌中高效重组表达的0-乙酰丝氨酸(硫醇)裂解酶A(OASS-A)合成药物中间体S-苯基-L-半胱氨酸,并对合成产物进行纯度及结构鉴定。方法通过PCR扩增目的基因CysK,并连接到pET-22b(4-)载体上构建原核表达质粒,重组体转到感受态大肠杆菌B121(DE,)中进行蛋白诱导表达,重组蛋白采用Ni2+-树脂柱亲和层析纯化,利用SDS-PAGE鉴定表达纯化蛋白,通过HPLC对合成产物纯度进行检测,应用。HNMR技术对化合物进行结构鉴定。结果成功构建了OASS-A原核表达载体,在IPrG诱