牛FcγRⅠ(CD64) GST融合蛋白在大肠杆菌中的表达

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【摘要】

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采用PCR技术从牛巨噬细胞cDNA文库中扩增了牛的高亲和力IgG Fc受体FcγRⅠ,测序结果显示与已报道的牛FcγRⅠ序列一致.在牛FcγRⅠ成熟蛋白胞外环区两端分别合成带有BamHⅠ、

【作者】

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张改平乔松林李青梅王丽张红郭军庆王选年夏春

【机构】

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河南省动物免疫学重点实验室,河南,郑州,450002中国农业大学动物医学院,北京,100094;

【出处】

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河南农业科学

【发表日期】

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2005年6期

【关键词】

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牛FcγRⅠ(CD64) GST融合蛋白表达

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采用PCR技术从牛巨噬细胞cDNA文库中扩增了牛的高亲和力IgG Fc受体FcγRⅠ,测序结果显示与已报道的牛FcγRⅠ序列一致.在牛FcγRⅠ成熟蛋白胞外环区两端分别合成带有BamHⅠ、XhoⅠ限制酶切位点的引物,用PCR扩增后亚克隆到GST融合蛋白表达载体pGEX-6P-1,转化宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导, SDS-PAGE 分析表达了N端带有GST的融合蛋白,Western-blotting 试验表明融合蛋白在变性条件下能和牛IgG结合.GST-FcγRⅠ融合蛋白的成功表达为研究牛IgG和受体的相互作用机制及其介导的免疫反应打下了基础.

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