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慢性乙肝患者石蜡包埋肝组织中HBV cccDNA定量检测方法的建立

来源 :解放军医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liangzi_li

【摘 要】

：

目的建立慢性乙肝患者微量石蜡包埋肝组织共价闭合环状DNA（HBV cccDNA）定量检测方法。方法以37例慢性乙肝患者甲醛固定石蜡包埋肝组织为研究对象,提取肝组织HBV DNA,经不降解质

【作 者】

：

韩佳琪 钟彦伟 任晓强 邹正升 刘树红 刘学恩 赵景民 徐东 

【机 构】

：

北京大学解放军302医院教学医院病毒性肝炎研究室,北京大学基础医学院病原生物学系

【出 处】

：

解放军医学杂志

【发表日期】

：

2011年5期

【关键词】

：

肝炎病毒 乙型 DNA 环状 核酸扩增技术 hepatitis B virus  DNA  circular  nucleic acid amplificati 

【基金项目】

：

[基金项目]国家“十一五”传染病重大专项课题（2009ZX10005-017,2008ZX10002-011,2009ZX10004-314）,北京市自然科学基金重点课题（7091006）,首都医学发展研究基金（2009-3057）

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目的建立慢性乙肝患者微量石蜡包埋肝组织共价闭合环状DNA（HBV cccDNA）定量检测方法。方法以37例慢性乙肝患者甲醛固定石蜡包埋肝组织为研究对象,提取肝组织HBV DNA,经不降解质粒的ATP依赖的DNA酶（PSAD）消化后,利用滚环扩增加跨缺口实时荧光PCR扩增技术检测肝组织中HBV cccDNA含量,以β-actin为内参照。通过已知浓度的模板DNA进行梯度稀释鉴定该方法的灵敏度,并对该方法进行批内和批间重复性检测。应用该方法分析37例慢性乙肝患者肝组织HBV cccDNA与血清总HBV DNA

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