【摘 要】
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目的 探讨Alisertib(ALS)对人结直肠癌Caco-2和HT29细胞的诱导自噬的作用及与p53表达状态间的关系.方法 本研究采用人结直肠癌Caco-2和HT29细胞进行实验.实验组用0.1、1、5μ
【机 构】
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南方医科大学顺德医院(佛山市顺德区第一人民医院)胃肠外科,广东顺德528308;南方医科大学顺德医院(佛山市顺德区第一人民医院)麻醉手术室,广州528308
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目的 探讨Alisertib(ALS)对人结直肠癌Caco-2和HT29细胞的诱导自噬的作用及与p53表达状态间的关系.方法 本研究采用人结直肠癌Caco-2和HT29细胞进行实验.实验组用0.1、1、5μmol/L ALS而对照组用同浓度的DMSO处理细胞.流式细胞术检测细胞的自噬率,Wester Blotting法检测细胞自噬过程中关键调节分子的蛋白表达.结果与对照组比较,0.1、1μmol/L Alisertib组Caco-2细胞自噬率增加,分别为26.4％和26.8％(P<0.01).1、5μmol/L ALS组HT29细胞自噬率增加,分别为36.8％和42.6％(P<0.01).Caco-2细胞不表达p53蛋白,而HT29细胞表达p53蛋白.与对照组比较,1、5μmol/L Alisertib引起Caco-2细胞的p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt和p-p38/p38的比值分别降低为对照组的62.6％、45.2％,30.1％、38.2％和49.0％、30.4％(P<0.01),LC3-Ⅱ/LC3-I的比值升高32.6％、46.8％(P<0.01).与对照组比较,1、5μmol/L Alisertib引起HT29细胞的p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt的比值分别降低为对照组的70.9％、66.3％和85.2％、27.2％(P<0.01),p-p38/p38和LC3-II/LC3-I的比值升高2.1倍、2.0倍和78.5％、84.8％(P<0.05).与5μmol/L Alisertib组比较,10μmol/L SB202190+5μmol/L Alisertib引起HT29细胞凋亡率升高64.7％(P<0.001),而Caco-2细胞凋亡率无明显变化.结论 Alisertib抑制了PI3K/Akt信号通路,诱导了Caco-2和HT29细胞发生细胞自噬.Alisertib对p38 MAPK信号通路的影响不同,激活了HT29而抑制了Caco-2细胞的p38 MAPK信号通路,可能与p53蛋白是否表达有关.
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