【摘 要】
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糖基化广泛存在于生物体中,具有非常重要的作用,而糖基转移酶则是催化糖基化反应的关键酶.本研究根据转录组数据库,设计引物从金银花(Lonicera japonica Thunb.)中克隆得到一
【机 构】
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江苏省中国科学院植物研究所,南京,210014;江苏省农业种质资源保护与利用平台,南京,210014
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糖基化广泛存在于生物体中,具有非常重要的作用,而糖基转移酶则是催化糖基化反应的关键酶.本研究根据转录组数据库,设计引物从金银花(Lonicera japonica Thunb.)中克隆得到一个糖基转移酶编码基因LjUGT71E1,序列分析表明该基因的CDS为1 503 bp,理论可编码氨基酸数目为501,等电点(pI)预测为5.09,理论分子量为55 579.71 Da.多重序列比对表明LjUGT71E1与其它植物UGT71家族成员在序列上保守性很高,并且其C端具有催化植物次生代谢产物糖基化的糖基转移酶所具有的保守的PSPG-box基序.系统发生分析表明LjUGT71E1与人参(Panax ginseng)和甜叶菊(Steuia rebaudiana)的UGT71E亚家族成员聚为一支.荧光定量PCR分析表明,该基因在金银花的五个花期均有表达,在幼蕾时期相对表达量达到峰值.进一步构建了LjUGT71E1基因的原核表达载体并且在大肠杆菌中诱导表达得到重组蛋白,为后续的功能研究提供了基础.
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