体外研究BMSCs中HIF-1α过表达与低表达对成骨和成血管相关因子的影响研究

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目的:探讨低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中过表达与低表达后对成骨和成血管相关细胞因子的影响.方法:分离并培养BMSCs采用流式细胞术进行鉴定;分别构建过表达与低表达质粒载体上调和下调HIF-1α基因的表达,将含绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的质粒转染至BMSCs.RT-PCR检测成骨分化特异标志物骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP),以及成血管特异标志物血管内皮生长因子(vascular endothelial grown factor,VEGF)、血管生成素-1(angiogenin-1,Ang-1)的mRNA表达水平.结果:流式细胞术鉴定BMSCs表面标记物CD29阳性率为98.5%,CD45阳性率为4.2%.RT-PCR结果显示过表达实验组BMSCs中HIF-1α的mRNA表达显著升高(P<0.001),BMP-2、ALP、VEGF和Ang-1表达均显著增高(P<0.001);低表达实验组BMSCs中HIF-1α的mRNA表达显著降低(P<0.001),BMP-2、Ang-1表达均显著降低(P<0.001),VEGF表达降低(P<0.05),ALP表达显著增高(P<0.001).结论:HIF-1α可调控BMSCs的成骨分化及成血管能力.
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