达兰猪精原干细胞的分离、纯化和初步鉴定

来源 :中国农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bohaiyifan
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对达兰仔猪睾丸精原细胞及精原干细胞进行了体外分离、纯化和初步鉴定。对8d达兰仔猪的睾丸实质组织,采用Ⅳ型胶原酶、透明质酸酶和胰酶组合消化法分离精细管细胞,制备单细胞悬液,用Percoll不连续密度(11%、19%、27%、35%和43%)梯度法纯化精原细胞;对纯化后的细胞培养12h,细胞贴壁后进行碱性磷酸酶(AKP)染色鉴定,初步确定精原千细胞及其比例。结果表明:所获精细管细胞悬液中活细胞和死细胞所占的比率分别为92.65%和7.35%,平均每克睾丸可获得4.17×10^7个细胞;精原细胞主要分
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