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摘要[目的]测定对比高寒地区引种栽培试验的12个桑树优良品种桑叶营养成分含量。[方法]对引进栽培试验成功的12个桑树优良品种及小叶桑秋雨采集叶片进行成分含量测定。 [结果]高寒地区引种成功各品种桑叶营养成分含量差异较大。[结论]为进一步研究桑叶产品开发提供了理论依据。
关键词品种；桑叶；成分测定；对比
中图分类号S888.3文献标识码
A文章编号0517-6611（2014）36-12868-03
Abstract [Objective] An experiment was done to measure and compare the nutrient content in Mulberry leaves from 12 varieties introduced from alpine region. [Method] The component content in Mulberry leaves from 12 good varieties introduced successfully and Morus australis Qiuyu were measured. [Result] The difference of nutrient content in these Mulberry leaves is quite big. [Conclusion] A theoretical basis was provided for further development of Mulberry leaves.
Key words Varieties； Mulberry leaf； Component measurement； Comparison
桑树属多年生阔叶木本植物，其根系发达，枝叶繁茂，品种繁多，在我国南方大部分地区均有栽培，尤以南方育蚕区品种较多，产量较大，而北方地区由于气候条件所限，栽培品种较少[1]。桑叶属于药食两用的营养保健食品资源之一[2]。近年来，随着国家实施“东桑西移”战略的发展，延长开发桑叶、桑果等桑副产品产业链条，发展桑产业多种经营，是增强保持桑蚕业可持续发展的迫切需要。该试验对高寒地区引种成功的优良桑树品种桑叶中所含营养成分进行测定和对比，对桑叶资源的开发和综合利用具有重要的指导作用。
1材料与方法
1.1供试材料
1.1.1样品采集。
试验样品为2014年9月20日采自在黑龙江省林口林业局栽培成功的12个优良品种及对照品种秋雨桑。
1.1.2仪器与试剂。试验仪器有紫外分光光度计、火焰分光光度计、电子分析天平、恒温水浴锅、电炉、离心机、烘箱、高温炉（500～550 ℃）、坩埚、研钵等。 试验试剂有盐酸、浓硫酸、石油醚、乙醚、乙醇、硝酸、高氯酸、氯化钾、氯化钠、磷酸、蒽酮、乙酸乙酯、蔗糖氧化镧、碳酸钙、正丙醇、正丁醇、冰醋酸、异丙醇、抗坏血酸、茚三酮、乙酸钠等。
1.2研究方法
1.2.1游离氨基酸含量测定。
氨基酸是组成蛋白质的基本单位，也是蛋白质的分解产物。植物根系吸收、同化的氮素主要以氨基酸和酰胺的形式进行运输。所以，测定氨基酸含量对研究植物在不同发育时期及不同环境条件下的氮素营养状况、氮素代谢以及根系生理均有重要意义。游离氨基酸含量测定采用茚三酮试剂显色法[3]，用10%乙酸提取桑叶样品中的游离氨基酸并定容，之后加入乙酸-氰酸盐缓冲液和水合茚三酮显色，以氨基酸标准溶液为标样绘制标准曲线，测定吸光度，计算游离氨基酸含量。
1.2.2蛋白质含量测定。
蛋白质作为细胞中含量最丰富的生物大分子，是生物体结构和功能最重要的基础物质之一。蛋白质含量测定采用紫外吸收法[4]，用0.1 mol/L pH7.0的磷酸缓冲液提取桑叶样品中的蛋白质，研磨、离心取上清液并定容后分别于280 nm和260 nm波长条件下测定吸光度值，计算样品中蛋白质含量。
1.2.3可溶性糖含量测定。
植物体内的碳素营养状况以及农产品的品质性状常以糖含量作为重要指标。植物为了适应逆境条件，如干旱、低温，也会主动积累一些可溶性糖，降低渗透势和冰点，以适应外界环境条件的变化。可溶性总糖含量测定采用蒽酮比色法，将桑叶样品放入试管中，加入5～10 ml蒸馏水，于沸水提取2次（每次30 min），提取液定容后加入蒽酮试剂和浓硫酸显色，以葡萄糖为标样绘制标准曲线，测定吸光度，计算可溶性总糖含量。
1.2.4粗脂肪含量测定。
脂肪广泛存在于植物种子和果实中，测定脂肪的含量，可以鉴别其品质的优劣。粗脂肪含量测定采用酸水解法，用盐酸充分水解桑叶样品，用乙醚提取样品中的粗脂肪，蒸干后置于95～105 ℃烘箱中干燥，去除杂质后称重，计算粗脂肪含量。
1.2.5灰分含量测定。
测定粗灰分的含量，可以了解各种植物在不同生育期和不同器官中养分吸收和累积状况以及土壤、施肥、气候、栽培管理等因素对植物灰分含量变化的影响。取桑叶新鲜样品经高温550～600 ℃灼烧，使桑叶中有机化合物分解挥发，矿物质成分转化为氧化物或碳酸盐，用重量法测定，即可计算灰分含量。
1.2.6钙含量测定。
钙元素的作用是保护细胞膜的稳定以及细胞内酶活动的调控，例如刺激膜上的结合酶、根部细胞质膜上的ATP酶活性、细胞内钙调蛋白的存在等都可能与钙元素有关。另一个作用是在细胞内，调节阴阳离子的平衡，在溶液中与草酸结合成草酸钙，对细胞的pH和渗透压都具有一定的调控作用。钙是某些酶的一个构造成分，其与钙调蛋白结合以后，可以加强一些酶的活性，可能与细胞之间的信息传递有联系。钙含量测定采用原子吸收分光光度法。桑叶试样经消化后，导入原子吸收分光光度计中，经火焰原子化后，吸收422.7 nm的共振线，其吸收量与含量成正比，与标准系列比较定量，经计算得钙含量。 1.2.7钠含量测定。
钠能够维持植物细胞内的渗透压，保持细胞的完整。钠含量测定采用原子吸收分光光度法。桑叶试样经消化后，导入原子吸收分光光度计中，经火焰原子化后，吸收589.0 nm的共振线，其吸收量与含量成正比，与标准系列比较定量，经计算得钠含量。
1.2.8钾含量测定。
钾是植物光合作用中不可缺少的矿质元素之一，它在光合作用中主要担负气孔的调节、活化与光合作用有关的酶、参与同化物的运输等重要的生理功能。植株缺钾时可发生叶尖叶缘枯死、叶色变黄现象，此时叶片叶绿素被破坏，三磷酸腺苷相对含量低，光合面积及光合时间减少，净光合速率明显下降，而适当施钾可使叶绿体基粒数增多，提高光合电子传递链活性及光合磷酸化活力，使量子需要量明显降低，净光合速率提高。钾能保持叶绿体内类囊体膜的结构正常，施钾可改善叶绿体结构及功能，提高叶绿素a、叶绿素b及叶绿素总量，延缓叶绿体降解与破坏，显著提高叶绿体的Hill反应及光合磷酸化活力，提高叶片的净光合速率。钾含量测定采用原子吸收分光光度法，桑叶试样经消化后，导入原子吸收分光光度计中，经火焰原子化后，吸收766.5 nm的共振线，其吸收量与含量成正比，与标准系列比较定量，经计算得钾含量。
2结果与分析
2.1各品种游离氨基酸含量各品种桑叶中游离氨基酸含量测定分析结果如图1所示。
13个品种桑树叶片中向海和龙桑的游离氨基酸含量较高，分别为2 314.025 mg/100 g和2 286.797 mg/100 g，冀3、铁耙和辽11的桑叶游离氨基酸含量较低，均没有超过砧木秋雨桑叶的游离氨基酸含量（1 407.881 mg/100 g），分别为1 246.678 mg/100 g、1 268.742 mg/100 g、1 280.154 mg/100 g，其余品种桑叶游离氨基酸含量均在1 407.881 ～1 982.112 mg/100 g之间。
3小结
通过对各品种桑叶测定表明，桑叶中含有多种营养元素和矿物质元素，这些元素在生理上也具有十分重要的作用，且各品种桑叶中所含成分含量各有差异。桑品种不同，叶片的营养成分含量存在很大差异。根据桑品种间营养成分含量的差异，高寒地区在桑叶产品研究开发中，可针对桑叶制药、制桑茶、制桑叶饲料的营养成分需求，根据各品种桑叶物质及营养成分含量，选择培育桑树优良品种，研究开发桑叶产品具有广阔的应用前景。
安徽农业科学2014年
参考文献
[1]
邹盛勤，陈武. 桑叶的化学成分、药理活性及应用研究进展[J].林产化工通讯，2003，37（1）：22-25.
[2] 李有贵，时连根.桑叶在医药中的开发应用[J].中国蚕业，2004，25（1）：77-79.
[3] 张军，穆莉.5种桑叶茶中氨基酸成分分析[J].北方蚕业，2005（3）：39-41.
[4] 李宁.几种蛋白质测定方法的比较[J].山西农业大学学报，2006（2）：132-134.
关键词品种；桑叶；成分测定；对比
中图分类号S888.3文献标识码
A文章编号0517-6611（2014）36-12868-03
Abstract [Objective] An experiment was done to measure and compare the nutrient content in Mulberry leaves from 12 varieties introduced from alpine region. [Method] The component content in Mulberry leaves from 12 good varieties introduced successfully and Morus australis Qiuyu were measured. [Result] The difference of nutrient content in these Mulberry leaves is quite big. [Conclusion] A theoretical basis was provided for further development of Mulberry leaves.
Key words Varieties； Mulberry leaf； Component measurement； Comparison
桑树属多年生阔叶木本植物，其根系发达，枝叶繁茂，品种繁多，在我国南方大部分地区均有栽培，尤以南方育蚕区品种较多，产量较大，而北方地区由于气候条件所限，栽培品种较少[1]。桑叶属于药食两用的营养保健食品资源之一[2]。近年来，随着国家实施“东桑西移”战略的发展，延长开发桑叶、桑果等桑副产品产业链条，发展桑产业多种经营，是增强保持桑蚕业可持续发展的迫切需要。该试验对高寒地区引种成功的优良桑树品种桑叶中所含营养成分进行测定和对比，对桑叶资源的开发和综合利用具有重要的指导作用。
1材料与方法
1.1供试材料
1.1.1样品采集。
试验样品为2014年9月20日采自在黑龙江省林口林业局栽培成功的12个优良品种及对照品种秋雨桑。
1.1.2仪器与试剂。试验仪器有紫外分光光度计、火焰分光光度计、电子分析天平、恒温水浴锅、电炉、离心机、烘箱、高温炉（500～550 ℃）、坩埚、研钵等。 试验试剂有盐酸、浓硫酸、石油醚、乙醚、乙醇、硝酸、高氯酸、氯化钾、氯化钠、磷酸、蒽酮、乙酸乙酯、蔗糖氧化镧、碳酸钙、正丙醇、正丁醇、冰醋酸、异丙醇、抗坏血酸、茚三酮、乙酸钠等。
1.2研究方法
1.2.1游离氨基酸含量测定。
氨基酸是组成蛋白质的基本单位，也是蛋白质的分解产物。植物根系吸收、同化的氮素主要以氨基酸和酰胺的形式进行运输。所以，测定氨基酸含量对研究植物在不同发育时期及不同环境条件下的氮素营养状况、氮素代谢以及根系生理均有重要意义。游离氨基酸含量测定采用茚三酮试剂显色法[3]，用10%乙酸提取桑叶样品中的游离氨基酸并定容，之后加入乙酸-氰酸盐缓冲液和水合茚三酮显色，以氨基酸标准溶液为标样绘制标准曲线，测定吸光度，计算游离氨基酸含量。
1.2.2蛋白质含量测定。
蛋白质作为细胞中含量最丰富的生物大分子，是生物体结构和功能最重要的基础物质之一。蛋白质含量测定采用紫外吸收法[4]，用0.1 mol/L pH7.0的磷酸缓冲液提取桑叶样品中的蛋白质，研磨、离心取上清液并定容后分别于280 nm和260 nm波长条件下测定吸光度值，计算样品中蛋白质含量。
1.2.3可溶性糖含量测定。
植物体内的碳素营养状况以及农产品的品质性状常以糖含量作为重要指标。植物为了适应逆境条件，如干旱、低温，也会主动积累一些可溶性糖，降低渗透势和冰点，以适应外界环境条件的变化。可溶性总糖含量测定采用蒽酮比色法，将桑叶样品放入试管中，加入5～10 ml蒸馏水，于沸水提取2次（每次30 min），提取液定容后加入蒽酮试剂和浓硫酸显色，以葡萄糖为标样绘制标准曲线，测定吸光度，计算可溶性总糖含量。
1.2.4粗脂肪含量测定。
脂肪广泛存在于植物种子和果实中，测定脂肪的含量，可以鉴别其品质的优劣。粗脂肪含量测定采用酸水解法，用盐酸充分水解桑叶样品，用乙醚提取样品中的粗脂肪，蒸干后置于95～105 ℃烘箱中干燥，去除杂质后称重，计算粗脂肪含量。
1.2.5灰分含量测定。
测定粗灰分的含量，可以了解各种植物在不同生育期和不同器官中养分吸收和累积状况以及土壤、施肥、气候、栽培管理等因素对植物灰分含量变化的影响。取桑叶新鲜样品经高温550～600 ℃灼烧，使桑叶中有机化合物分解挥发，矿物质成分转化为氧化物或碳酸盐，用重量法测定，即可计算灰分含量。
1.2.6钙含量测定。
钙元素的作用是保护细胞膜的稳定以及细胞内酶活动的调控，例如刺激膜上的结合酶、根部细胞质膜上的ATP酶活性、细胞内钙调蛋白的存在等都可能与钙元素有关。另一个作用是在细胞内，调节阴阳离子的平衡，在溶液中与草酸结合成草酸钙，对细胞的pH和渗透压都具有一定的调控作用。钙是某些酶的一个构造成分，其与钙调蛋白结合以后，可以加强一些酶的活性，可能与细胞之间的信息传递有联系。钙含量测定采用原子吸收分光光度法。桑叶试样经消化后，导入原子吸收分光光度计中，经火焰原子化后，吸收422.7 nm的共振线，其吸收量与含量成正比，与标准系列比较定量，经计算得钙含量。 1.2.7钠含量测定。
钠能够维持植物细胞内的渗透压，保持细胞的完整。钠含量测定采用原子吸收分光光度法。桑叶试样经消化后，导入原子吸收分光光度计中，经火焰原子化后，吸收589.0 nm的共振线，其吸收量与含量成正比，与标准系列比较定量，经计算得钠含量。
1.2.8钾含量测定。
钾是植物光合作用中不可缺少的矿质元素之一，它在光合作用中主要担负气孔的调节、活化与光合作用有关的酶、参与同化物的运输等重要的生理功能。植株缺钾时可发生叶尖叶缘枯死、叶色变黄现象，此时叶片叶绿素被破坏，三磷酸腺苷相对含量低，光合面积及光合时间减少，净光合速率明显下降，而适当施钾可使叶绿体基粒数增多，提高光合电子传递链活性及光合磷酸化活力，使量子需要量明显降低，净光合速率提高。钾能保持叶绿体内类囊体膜的结构正常，施钾可改善叶绿体结构及功能，提高叶绿素a、叶绿素b及叶绿素总量，延缓叶绿体降解与破坏，显著提高叶绿体的Hill反应及光合磷酸化活力，提高叶片的净光合速率。钾含量测定采用原子吸收分光光度法，桑叶试样经消化后，导入原子吸收分光光度计中，经火焰原子化后，吸收766.5 nm的共振线，其吸收量与含量成正比，与标准系列比较定量，经计算得钾含量。
2结果与分析
2.1各品种游离氨基酸含量各品种桑叶中游离氨基酸含量测定分析结果如图1所示。
13个品种桑树叶片中向海和龙桑的游离氨基酸含量较高，分别为2 314.025 mg/100 g和2 286.797 mg/100 g，冀3、铁耙和辽11的桑叶游离氨基酸含量较低，均没有超过砧木秋雨桑叶的游离氨基酸含量（1 407.881 mg/100 g），分别为1 246.678 mg/100 g、1 268.742 mg/100 g、1 280.154 mg/100 g，其余品种桑叶游离氨基酸含量均在1 407.881 ～1 982.112 mg/100 g之间。
3小结
通过对各品种桑叶测定表明，桑叶中含有多种营养元素和矿物质元素，这些元素在生理上也具有十分重要的作用，且各品种桑叶中所含成分含量各有差异。桑品种不同，叶片的营养成分含量存在很大差异。根据桑品种间营养成分含量的差异，高寒地区在桑叶产品研究开发中，可针对桑叶制药、制桑茶、制桑叶饲料的营养成分需求，根据各品种桑叶物质及营养成分含量，选择培育桑树优良品种，研究开发桑叶产品具有广阔的应用前景。
安徽农业科学2014年
参考文献
[1]
邹盛勤，陈武. 桑叶的化学成分、药理活性及应用研究进展[J].林产化工通讯，2003，37（1）：22-25.
[2] 李有贵，时连根.桑叶在医药中的开发应用[J].中国蚕业，2004，25（1）：77-79.
[3] 张军，穆莉.5种桑叶茶中氨基酸成分分析[J].北方蚕业，2005（3）：39-41.
[4] 李宁.几种蛋白质测定方法的比较[J].山西农业大学学报，2006（2）：132-134.