赭曲霉毒素A（Ochratoxin A，OTA）是国际癌症研究机构认定的“2B”类致癌物。黑曲霉Aspergillus nige是美国食品药品监督局认可的食品安全菌。然而近年来陆续发现某些黑曲霉菌株能够产生OTA，这会对人类健康构成潜在威胁。阐明黑曲霉生物合成OTA的关键基因，有助于理解OTA生物合成机制，这对OTA污染的防控具有重要意义。本研究克隆了产OTA黑曲霉中非核糖体肽合成酶（NRPS）编码基因（An15g07910），并对其进行了生物信息学分析，在此基础上采用同源重组的方法敲除了该基因，获得了一株性能稳定的敲除突变株Δnrps。与野生株相比，Δnrps突变株的表型在CYA培养基中并无明显改变，但在7d培养期间完全失去了合成赭曲霉毒素α（Ochratoxin α，OTα）和OTA的能力，而赭曲霉毒素β（Ochratoxin β，OTβ）的合成不受影响。在野生株培养过程中，该nrps基因前4d表达量逐渐增大，并在第4d达到最高，随后基因表达量逐渐下降并趋于稳定，这与OTA的含量变化基本一致。结果表明该nrps基因（An15g07910）参与OTA的生物合成，其编码的NRPS可能负责催化苯丙氨酸部分和二氢异香豆素部门的交联。