【摘 要】
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目的 探讨核因子κB(NF-κB)家族成员(RelA、p50、RelB和p52)调控抑癌基因乳腺丝氨酸蛋白酶抑制剂(Maspin)表达的可能机制.方法 采用Western blot法检测前列腺癌细胞株DU145
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目的 探讨核因子κB(NF-κB)家族成员(RelA、p50、RelB和p52)调控抑癌基因乳腺丝氨酸蛋白酶抑制剂(Maspin)表达的可能机制.方法 采用Western blot法检测前列腺癌细胞株DU145、PC-3和LNCaP中NF-κB家族成员和Maspin蛋白的表达情况.采用RNA干扰技术结合Western blot法,检测RelB或RelA沉默对前列腺癌DU145细胞中Maspin蛋白表达的影响.采用流式细胞术检测RelB沉默后前列腺癌DU145细胞的死亡情况.通过转染RelB表达质粒并建立稳定表达细胞株,观察过表达RelB对前列腺癌PC-3细胞中Maspin蛋白表达的影响.结果 RelA、p50、RelB和p52蛋白在雄激素非依赖型前列腺癌细胞株DU145和PC-3中呈持续性高表达,其中RelB蛋白在DU145细胞中的表达最为显著.Maspin蛋白在LNCaP和DU145细胞中低表达,而在PC-3细胞中高表达.在DU145细胞中,沉默RelB可以诱导Maspin蛋白表达上调,同时促进细胞死亡[死亡率为(13.3±4.2)％].在PC-3细胞中,过表达RelB可抑制Maspin的内源性表达.RelA沉默对DU145细胞中Maspin蛋白的表达无显著影响.结论 在雄激素非依赖型前列腺癌细胞株中,NF-κB经典与非经典通路蛋白持续性活化,RelB与Maspin的表达呈负相关性.RelB负性调控了内源性Maspin的表达,进而影响了前列腺癌细胞的存活.RelA并不参与对Maspin表达的调控.
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