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目的:构建针对大鼠肝癌细胞的HSV-tk/GCV(以下简称ck/GCV系统)自杀基因治疗系统,建立比较瞳/GCV系统作用效果及其旁观者效应大小的细胞模型和检测方法.方法:用包装细胞PT67胜分泌的重组逆转录病毒的活性颗粒感染大鼠肝癌CBRH7919细胞,用G418筛选3wk获得高耐药性的重组子CBRH7919/tk,扩大培养,提取CBRH7919(tk),CBRH7919/tk(tk^+)细胞的DNA,把HSV-tk基因片段用Dig标记为探针后,与2种DNA及阳性对照DNA进行点杂交,以检测tk^+细胞的