【摘 要】
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报道了人肿瘤坏死因子α(hTNFα)基因穿梭表达载体的构建及其在丝状体蓝藻鱼腥藻7120中的表达和鉴定结果. 将质粒pRL-rhTNF上hTNFα的cDNA连于pRL-439质粒上的PpsbA启动子下
【机 构】
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中国科学院植物研究所,北京,100093广州军区广州总医院医学实验科,广州,510010;中国科学技术大学生物系93级,合肥,230027;中国医学科学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室,北京,10
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报道了人肿瘤坏死因子α(hTNFα)基因穿梭表达载体的构建及其在丝状体蓝藻鱼腥藻7120中的表达和鉴定结果. 将质粒pRL-rhTNF上hTNFα的cDNA连于pRL-439质粒上的PpsbA启动子下游,得到中间载体pRL-TC. 进一步与穿梭质粒pDC-8重组,得到可在大肠杆菌和蓝藻中均可表达的穿梭表达载体pDC-TNF. pRL-rhTNF,pRL-TC和pDC-TNF三者在大肠杆菌中的表达量分别为11.8%, 16.9%和15.0%. 通过三亲接合转移将pDC-TNF引入鱼腥藻7120中并获稳定遗传的转基因株. 从转基因的鱼腥藻7120中检测到pDC-TNF质粒的存在,且在和TNFα的cDNA探针进行的Southern杂交中呈阳性反应. 抽提转基因藻的蛋白样品进行检测,在Western印迹中和TNFα单克隆抗体呈阳性反应. 采用TNF对L929细胞的细胞毒性方法,证明转基因藻粗提液中,TNF确有细胞毒活性.
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为探究吕家坨井田地质构造格局,根据钻孔勘探资料,采用分形理论和趋势面分析方法,研究了井田7
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