【摘 要】
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目的 制备高表达量、高活性的HV NP重组抗原,以此为基础建立一个可同时检测HFRS患者血清中IgM和IgG抗体的快速胶体金标记诊断试剂盒.方法 从TA-A537中扩增出截短的HV S基因片段p6-119,定向克隆至原核表达载体pET-30a中进行原核表达,采用亲和层析法纯化重组蛋白.以胶体金标记重组抗原,应用金标快速免疫层析法同时检测HFRS患者血清中IgM和IgG抗体.结果 金标快速免疫层析法
【机 构】
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350001,福州,福建省疾病预防控制中心,350001,福州,福建省疾病预防控制中心,350001,福州,福建省疾病预防控制中心,350001,福州,福建省疾病预防控制中心
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目的 制备高表达量、高活性的HV NP重组抗原,以此为基础建立一个可同时检测HFRS患者血清中IgM和IgG抗体的快速胶体金标记诊断试剂盒.方法 从TA-A537中扩增出截短的HV S基因片段p6-119,定向克隆至原核表达载体pET-30a中进行原核表达,采用亲和层析法纯化重组蛋白.以胶体金标记重组抗原,应用金标快速免疫层析法同时检测HFRS患者血清中IgM和IgG抗体.结果 金标快速免疫层析法可同时检测HFRS患者血清中IgM和IgG抗体,与IFA比较,IgG抗体检测的敏感性和特异性分别为94.9%、100%.与ELISA比较,IgM抗体检测的敏感性和特异性均为100%.结论 截短的重组汉坦病毒NP蛋白表达量高且具有良好的抗原性.以此为基础建立的金标快速免疫层析法显示出很高的敏感性和特异性,且具有简便、快速等优点,非常适用于各种层次尤其是缺乏实验条件和专业人员的基层医疗单位对HFRS疑似患者作出早期诊断。
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