青花菜农杆菌遗传转化影响因素研究

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以青花菜"绿秀"为试材,以带柄子叶为外植体,采用根癌农杆菌LBA4404菌株进行农杆菌遗传转化,研究了影响青花菜遗传转化的主要因素。结果表明:乙酰丁香酮浓度、OD600值、侵染时间等对瞬间表达均有一定的影响。其中,OD600值影响最大,AS浓度影响次之,再次是侵染时间。最适宜的试验条件为:乙酰丁香酮浓度为100μmol/L、OD600值为0.3、侵染时间为5min。抗性植株经PCR检测、Southern杂交和GUS组织化学染色法,表明目的基因已整合到青花菜基因组中并得到了很好的表达。
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