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用针对引导序列的5-引物和针对恒定区的3-引物,常规PCR程序只使所选5株单抗10个可变区cDNA中的4个得到放大,新设计的程序增设了一个反应时相:94℃1min,37℃6-8min,循环1-3次,只加入5-引物,补充3-引物后,转入常规PCR循环。10个可变cDNA均获放大,此程序被命名为“单引物预掺入PCR”。