信号蛋白质14-3-3ζ的高效融合表达和鉴定

来源 :中国神经免疫学和神经病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xdbgm520

【摘要】

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目的利用分子克隆技术在原核细胞中研究14-3-3ζ蛋白的表达. 方法 14-3-3ζ cDNA 经测序后,亚克隆至pBK-CMV表达载体,转化大肠杆菌BL21菌株,筛选阳性克隆,经异丙基硫代-β-D-

【作者】

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祖莹沈继龙汪学龙李德发

【机构】

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蚌埠医学院免疫教研室,安徽医科大学病原生物学教研室,蚌埠医学院免疫研究所

【出处】

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中国神经免疫学和神经病学杂志

【发表日期】

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2004年期

【关键词】

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14-3-3ζ 克隆信号传导克雅症

【基金项目】

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安徽省自然科学基金;

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目的利用分子克隆技术在原核细胞中研究14-3-3ζ蛋白的表达. 方法 14-3-3ζ cDNA 经测序后,亚克隆至pBK-CMV表达载体,转化大肠杆菌BL21菌株,筛选阳性克隆,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达. 结果经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(Western blot)分析,表达的融合蛋白相对分子质量为32 000左右,能与14-3-3ζ蛋白特异性多克隆抗体发生免疫结合反应. 结论人14-3-3ζ蛋白在原核细胞中有大量表达,且具有良好的免疫反应性.

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