枣选择性扩增微卫星体系的建立及优化

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【目的】建立和优化枣的选择性扩增微卫星(SAM)技术体系,丰富枣群体遗传学研究的方法,同时为枣利用SAM法开发SSR引物提供技术参考和模板。【方法】以冬枣、大荔龙枣和金丝小枣为试材,采用CTAB法提取样品DNA,对SAM试验过程中的酶切-连接、抑制性扩增、预扩增、选择性扩增等关键因子进行研究。【结果】利用PstI和MseI双酶切系统,分步法进行酶切-连接是后续试验成功的关键,抑制性扩增(20.0“L体系)模板取酶切连接液2,0μL,预扩增和选择性扩增(20.0μL体系)的模板分别取上步扩增的稀释产物各2.
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