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为获得一种易操作、高效、高纯度的连翘酯苷 A 制备工艺，以聚酰胺和 MDS-5为分离材料，采用单因素多水平试验的方法考察上样量、上样浓度、洗脱流速等因素对连翘酯苷 A 得率和纯度的影响，优化两步柱分离纯化工艺条件。试验结果表明，以聚酰胺为分离材料可获得连翘酯苷 A 含量为50%的产物，产物以 MDS 为分离材料进一步分离可获得连翘酯苷 A 含量为90%的产物。本方法具有分离效率高、溶剂毒性小等优点，是一种获得高含量连翘酯苷 A 的简便、高效、经济的方法。