era基因的高表达

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huanyingchangmaoshou
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为了高表达产生Era蛋白,借助计算机从Gene Bank中寻找N端几个氨基酸序列与Era相同的蛋白质,选其中能在大肠杆菌内高表达的λ Ea8.5蛋白,以其基因5’端序列替代天然era基因5’端序列,从而赋予era基因转录物以强的翻译起始信号,而不改变其编码的氨基酸序列。将此重组era基因置于P_L启动子下游、构建得质粒pCE31,引入大肠杆菌TAP106,经诱导后大量合成Era蛋白,且其他蛋白质的合成显著被抑制,从而使Era的含量能超过菌体总蛋白量的80%。经简单裂菌、洗涤步骤,就获得具有能特异结合鸟苷酸
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