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建立了一种高效液相色谱法分离测定赤霉素(GA3)和吲哚乙酸(IAA)的方法. 采用Agilent ZORBA×300SB-C18(4.6 mm×250 mm)色谱柱,以甲醇:水=35:65,(V/V,含2%冰醋酸)为流动相,柱温为 25 ℃,流速为0.5 mL/min. 系统讨论了流动相组成及pH对分离的影响. 本法测定GA3和IAA的线性范围分别为25.0~1 000 μg/mL、2.5~50.0 μg/mL. 方法回收率分别为85.63%、90.21%. 并将该方法成功应用于菌肥中